ในปี 2018 HELENE Clinic ได้นำเสนอผลการวิจัยเกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์แบบปราศจากซีรัมที่พัฒนาขึ้นเอง (HELENE Medium) ในงาน Cambridge
International Stem Cell Symposium
ผลการศึกษาที่นำเสนอมี 2 ประเด็น ได้แก่
1. HELENE Medium สามารถเพาะเลี้ยงเซลล์ได้ในจำนวนมากกว่าอาหารเลี้ยงเซลล์เชิงพาณิชย์ทั่วไป ภายในระยะเวลาเท่ากัน
2. Mesenchymal Stem Cells (MSC) ที่เพาะเลี้ยงด้วย HELENE Medium มีขนาดเล็กที่สุด
มีหลักฐานทางวิชาการระบุว่า ยิ่งสเต็มเซลล์มีขนาดเล็ก ก็ยิ่งมีแนวโน้มที่จะเปลี่ยนแปลงไปเป็นไฟโบรบลาสต์ (Fibroblast) ได้ยากกว่า
จากผลการศึกษาทั้งสองประเด็นนี้ จึงยืนยันได้ว่า เนื้อเยื่อไขมันที่เก็บจากบริเวณหลังใบหูมี MSC อยู่ แม้ว่าปริมาณไขมันที่เก็บได้จะน้อยกว่าบริเวณต้นขาหรือ
หน้าท้อง แต่ด้วยเทคโนโลยีเฉพาะตัวในแล็บของเราและ HELENE Medium ทำให้สามารถเพาะเลี้ยง MSC ได้สูงสุด 2.25 พันล้านเซลล์ภายใน 1 เดือน
เพื่อรับรองคุณภาพของสเต็มเซลล์ที่ HELENE Clinic ให้บริการแก่ผู้ป่วย ทางคลินิกได้ว่าจ้าง
หน่วยงานภายนอกให้ดำเนินการทดสอบตัวอย่างสเต็มเซลล์ที่ผลิตด้วยกระบวนการเดียวกับที่ใช้ใน
การออกใบรับรองคุณภาพฉบับนี้
การทดสอบดำเนินการตามมาตรฐาน GMP (Good Manufacturing Practice) และ GLP สำหรับ
เวชศาสตร์ฟื้นฟู (Good Laboratory Practice) รวมถึงการทดสอบที่ออกแบบขึ้นเฉพาะจำนวน
3 รายการ
ก่อนนำสเต็มเซลล์ไปใช้รักษาผู้ป่วย แล็บของทางคลินิกจะดำเนินการตรวจสอบในมาตรฐานเดียวกัน
และผลการประเมินคุณภาพสเต็มเซลล์โดยหน่วยงานตรวจสอบอิสระก็แสดงไว้ในเอกสารฉบับนี้เช่นกัน
ตัวอย่างที่ส่งตรวจเป็นสเต็มเซลล์ที่เพาะเลี้ยงจากเนื้อเยื่อไขมันของผู้ให้ตัวอย่างจำนวน 3 ราย ภายในแล็บของคลินิก
เนื้อเยื่อถูกเก็บจากบริเวณหลังใบหู ผ่านกระบวนการแยกและย่อยเนื้อเยื่อด้วยเทคนิคเฉพาะและ
เอนไซม์เฉพาะ จากนั้นนำเซลล์ที่แยกได้มาเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 1 เดือน เมื่อได้จำนวนเซลล์ตามเกณฑ์ จึงคัดแยกด้วย MACS ตรวจนับจำนวนเซลล์ด้วย Cell Counter ก่อนส่งตัวอย่างไปยังบริษัท
Takara Bio Inc. เพื่อดำเนินการตรวจสอบโดยบุคคลที่สาม
| วัตถุประสงค์ของการทดสอบ | รายการทดสอบ | ตัวอย่างข้อกำหนด | ผลลัพธ์ |
|---|---|---|---|
| การติดเชื้อและการปนเปื้อน | การทดสอบความปลอดเชื้อ (Japanese Pharmacopoeia: Direct Method, ตัวเลือกเพิ่มเติม: Suitability Test) |
QC_AL Lot:#13349 | ผลเป็นลบ (Negative) |
| การทดสอบความปลอดเชื้อ (Japanese Pharmacopoeia: Direct Method) |
QC_AL Lot:#13349 | ผลเป็นลบ (Negative) | |
| การตรวจยืนยันว่าไม่มีเชื้อ Mycoplasma (Japanese Pharmacopoeia Reference Infor- mation: วิธี PCR พร้อมยืนยันการตรวจ 7 สายพันธุ์) |
QC_AL Lot:#13349 | ผลเป็นลบ (Negative) | |
| การทดสอบ Endotoxin (Japanese Pharmacopoeia: Kinetic Turbidime- tric Method, ตัวเลือกเพิ่มเติม: การทดสอบปัจจัย รบกวนปฏิกิริยา) |
QC_AL Lot:#13349 | ผลเป็นลบ (Negative) | |
| การทดสอบ Endotoxin (Japanese Pharmacopoeia: Kinetic Turbidime- tric Method) |
QC_AL Lot:#13349 | ต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจพบ | |
| การเกิดเนื้องอก | การทดสอบการสร้างโคโลนี (Colony Formation Assay) |
QC_AL Lot:#13349 | ผลเป็นลบ (Negative) |
| การยืนยันว่าเป็นสเต็มเซลล์ | การทดสอบด้วย Flow Cytometry (FCM) (CD45− / CD105+) |
QC_AL Lot:#13349 | CD45- 92.1％ CD105+ 100% |
ภาพด้านบนเป็นภาพประกอบของเนื้อเยื่อไขมัน โดยวัตถุทรงกลมคล้ายเมล็ดถั่วคือเซลล์ไขมัน
สเต็มเซลล์ไม่ได้อยู่ภายในหยดไขมัน แต่แฝงตัวอยู่ในโครงสร้างเส้นใยคล้ายตาข่ายที่เรียกว่า Stem Cell Niche ซึ่งล้อมรอบเนื้อเยื่อไขมัน
ต่อไปนี้เป็นการเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่างเนื้อเยื่อไขมันบริเวณหลังใบหูและบริเวณหน้าท้อง
| ไขมันบริเวณหลังใบหู | ไขมันใต้ผิวหนังบริเวณหน้าท้อง | |
| ลักษณะ ภายนอก |
 |
 |
| รูปภาพ |  |
 |
| อาการปวด | น้อย | ค่อนข้างมาก (คล้ายอาการฟกช้ำ) |
| รอยช้ำ | พบได้น้อยมาก | พบได้บ่อย |
| การกดแผล | ปิดด้วยพลาสเตอร์กดแผลเท่านั้น | ใช้ผ้าก๊อซกดแผล |
เนื้อเยื่อไขมันไม่ได้มีสเต็มเซลล์อยู่ภายในหยดไขมันสีเหลือง แต่สเต็มเซลล์จะอยู่บริเวณเนื้อเยื่อรอบหยดไขมัน ซึ่งเรียกว่า สโตรมา (Stroma) หรือ Stem Cell Niche แม้ว่าทั้งไขมันบริเวณหน้าท้องและบริเวณหลังใบหูจะมีสเต็มเซลล์อยู่ แต่เนื้อเยื่อไขมันที่มีหยดไขมันน้อยและมีสโตรมามากจะมีสัดส่วนของสเต็มเซลล์
สูงกว่า
HELENE Clinic เลือกเก็บเนื้อเยื่อไขมันจากบริเวณหลังใบหูเป็นหลัก เนื่องจากช่วยลดความเจ็บปวดของผู้เข้ารับการรักษา อย่างไรก็ตาม หากผู้เข้ารับ
การรักษาต้องการ ก็สามารถเก็บเนื้อเยื่อไขมันด้วยวิธีดูดไขมันจากบริเวณหน้าท้องได้เช่นกัน
สเต็มเซลล์ที่เพาะเลี้ยงใน HELENE Cell Center จะได้รับการตรวจวัด จำนวนเซลล์ และ อัตราการมีชีวิตของเซลล์ (Cell Viability) อย่างน้อย 2 ขั้นตอน
ก่อนนำไปใช้รักษา เพื่อยืนยันคุณภาพของเซลล์ที่จะส่งมอบแก่ผู้เข้ารับบริการ
ผลการตรวจจะได้รับการรับรองและจัดพิมพ์โดยห้องปฏิบัติการ เพื่อให้มั่นใจว่าผู้เข้ารับการรักษาทุกท่านจะได้รับสเต็มเซลล์ที่ผ่านการตรวจสอบด้วยกระบวนการที่มีหลักฐานทางวิทยาศาสตร์และมีความรับผิดชอบ
หลังจากเตรียมตัวอย่างเซลล์ จะทำการย้อมด้วยสาร 0.4% Trypan Blue ซึ่งเป็นสารที่ใช้แยกเซลล์มีชีวิตและเซลล์ที่ตายแล้ว
วิธีนี้อาศัยหลักการ Dye Exclusion Test โดยสารย้อมจะซึมผ่านเข้าไปในเซลล์ที่ตายแล้ว แต่ไม่สามารถผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ที่ยังมีชีวิตได้ จึงสามารถใช้คำนวณอัตราการรอดชีวิตของเซลล์ได้
ในอดีต ตัวอย่างที่ย้อมแล้วต้องตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์และนับจำนวนเซลล์ด้วยมือ แต่ปัจจุบันใช้เครื่องนับเซลล์อัตโนมัติในการตรวจจับและวิเคราะห์ภาพโดยอัตโนมัติ
สำหรับการนับด้วยมือ ผู้ปฏิบัติงานต้องปรับโฟกัสและความสว่างของภาพในแต่ละตัวอย่างเอง ขณะที่ Countess II FL สามารถปรับแสงและโฟกัสโดยอัตโนมัติ เพื่อให้ได้ภาพที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ทุกครั้ง
หลังจากวัดจำนวนเซลล์ด้วย Countess II FL แล้ว เราจะนำตัวอย่างเซลล์วางบนสไลด์ และบันทึกภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์ ZEISS Axio Vert.A1
จากนั้นใช้โปรแกรม AI สำหรับวิเคราะห์ภาพที่ HELENE พัฒนาขึ้น เพื่อตรวจสอบโครงสร้างเซลล์ในระดับ Confocal พร้อมวิเคราะห์ร่วมกับระยะ
โฟกัสของกล้อง ชนิดของเซลล์ (MSC) และพื้นที่หน้าตัดของขวดเพาะเลี้ยง เพื่อคำนวณจำนวนเซลล์และอัตราการรอดชีวิตของเซลล์
การตรวจสอบทั้งสองขั้นตอนนี้ช่วยเพิ่มความแม่นยำของการวิเคราะห์ และเป็นกระบวนการเฉพาะของ HELENE เพื่อให้มั่นใจว่าสเต็มเซลล์เกรดสำหรับการรักษาที่นำไปใช้มีคุณภาพสอดคล้องกับมาตรฐานที่กำหนด
HELENE Clinic จะออก "ใบรับรองคุณภาพสเต็มเซลล์" ทุกครั้งที่มีการรักษาเกิดขึ้นเพื่อแสดงความรับผิดชอบด้านคุณภาพและความโปร่งใส
จากงานวิจัย "The Safety of MSC Therapy over the Past 15 Years: A Meta-analysis" ซึ่งตีพิมพ์ในปี 2021 ได้วิเคราะห์งานวิจัยจำนวน
62 ฉบับ รวมถึงการศึกษาทางคลินิกที่ตีพิมพ์ในวารสารระดับนานาชาติ The Lancet
ผลการศึกษาพบว่า ในการทดลองทางคลินิกดังกล่าว มีการใช้ Mesenchymal Stem Cells (MSC) ในปริมาณตั้งแต่ 500 ล้านเซลล์ และในบางกรณีสูงถึง 1 พันล้านเซลล์
ผลการศึกษานี้เป็นข้อมูลอ้างอิงที่ใช้ประกอบการพัฒนาเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงและการใช้สเต็มเซลล์ของ HELENE Clinic
| Author | Year | Location | Dose | |
|---|---|---|---|---|
| Hess | 2017 | USA | 1200×106 cells | สเต็มเซลล์ 1.2 พันล้านเซลล์ |
| Bartunek | 2013 | Belgium | 600 -1200×106 cells | สเต็มเซลล์ 6-1.2 พันล้านเซลล์ |
| Chanbers | 2017 | Australia | 1×109 cells | สเต็มเซลล์ 1 พันล้านเซลล์ / ภาวะปอดผิดปกติ |
| Steinberg | 2017 | USA | 1×109 cells | สเต็มเซลล์ 1 พันล้านเซลล์ / โรคหลอดเลือดสมอง |
| Igresias | 2021 | Mexico | 1×109 cells | สเต็มเซลล์ 1 พันล้านเซลล์ / ภาวะปอดผิดปกติ |
| Matsuoka | 2024 | Japan | 1-2×109 cells | สเต็มเซลล์ 2 พันล้านเซลล์ / Anti Aging |
จากข้อมูลทางคลินิกจำนวนมาก พบว่าแทบไม่มีรายงานการใช้สเต็มเซลล์ในปริมาณต่ำเพื่อรักษาโรคบาง
ชนิด จึงมีข้อเสนอแนะว่าในบางกรณี การใช้ Mesenchymal Stem Cells (MSC) ในปริมาณต่ำอาจให้
ผลการรักษาที่จำกัด
ในอนาคต เมื่อมีข้อมูลทางวิทยาศาสตร์และผลการวิจัยใหม่ ๆ เพิ่มขึ้น จำเป็นต้องมีการปรับปรุงและกำหนดมาตรฐานอย่างต่อเนื่องในด้านแนวทางการรักษาด้วย MSC ข้อบ่งใช้ แหล่งที่มาของเซลล์ วิธีการ
เพาะเลี้ยงและปริมาณเซลล์ที่ใช้ เพื่อให้สามารถเปรียบเทียบผลการศึกษาทางคลินิกได้อย่างมี
ประสิทธิภาพมากยิ่งขึ้น
HELENE Clinic จึงพัฒนาโปรแกรมการรักษาที่กำหนดปริมาณสเต็มเซลล์และเอ็กโซโซมให้เหมาะสม
กับอายุ สภาพร่างกาย และโรคของผู้เข้ารับการรักษา พร้อมทั้งมุ่งมั่นพัฒนาแนวทางการรักษาอย่าง
ต่อเนื่อง เพื่อมอบการรักษาด้วยสเต็มเซลล์ที่มีความปลอดภัยและมีคุณภาพสูง
[อ้างอิง] The safety of MSC therapy over the past 15 years: a meta-analysis.
https://doi.org/10.1186/s13287-021-02609-x
| เวลาทำการของคลินิก | 10:00～19:00 |
|---|---|
| วันปิดทำการ | วันอาทิตย์ วันพุธที่ 1 และ 3 ของเดือน |
| ที่อยู่ | 107-0062 5-9-15 มินามิ-อาโอยามะ, มินาโตะ-คุ, โตเกียว อาคารอาโอยามะ โอโมโตะ ชั้น 3 |
| โทรศัพท์ | 03-3400-2277 |